凯氏定氮法全过程颜色变化

凯氏定氮法是分析有机化合物含氮量的常用方法。即在有催化剂的条件下，用浓硫将有机氮都转变成无机铵盐，然后在碱性条件下将铵盐转化为氨，随水蒸气蒸馏出来并为过量的硼酸液吸收，再以标准盐酸滴定，计算出样品中的氮量。

首先将待测物中的氨在加强热及硫酸铜催化，浓硫酸作用下，生成硫酸铵。此过程最终溶液需要呈蓝绿色澄清透明溶液。

第二步是在溶液中加入氢氧化钠，通过蒸馏释放出氨，收集于硼酸溶液中。硼酸溶液中提前加入甲基红-溴甲酚绿指示剂，可以观察到溶液由暗红色变为绿色。

最后用已知浓度的盐酸或硫酸标准溶液滴定，根据标准酸溶液的消耗量计算出氮的含量。滴定过程中，溶液颜色由绿色变为灰绿色为终点。

凯氏定法

凯氏定氮法

凯氏定氮法是由丹麦化学家凯道尔于1833年建立的，现已发展为常量、微量、平微量凯氏定氮法以及自动定氮仪法等，是分析有机化合物含氮量的常用方法。凯氏定氮法的理论基础是蛋白质中的含氮量通常占其总质量的16%左右(12%~一19%),因此，通过测定物质中的含氮量便可估算出物质中的总蛋白质含量(假设测定物质中的氮全来自蛋白质)，即: 蛋白质含量=含氮量/16%。

凯氏定氮法是测定化合物或混合物中总氮量的一种方法。即在有催化剂的条件下，用浓硫酸消化样品将有机氮都转变成无机铵盐，然后在碱性条件下将铵盐转化为氨，随水蒸气蒸馏出来并为过量的硼酸液吸收，再以标准盐酸滴定，就可计算出样品中的氮量。由于蛋白质含氮量比较恒定，可由其氮量计算蛋白质含量，故此法是经典的蛋白质定量方法。

凯氏定氮法什么时候使用

凯氏定氮法是测定化合物或混合物中总氮量的一种方法。即在有催化剂的条件下，用浓硫酸消化样品将有机氮都转变成无机铵盐，然后在碱性条件下将铵盐转化为氨，随水蒸气蒸馏出来并为过量的硼酸液吸收，再以标准盐酸滴定，就可计算出样品中的氮量。

由于蛋白质含氮量比较恒定，可由其氮量计算蛋白质含量，故此法是在测定蛋白质定量的时候使用。

凯氏定氮法观察到的主要现象

凯氏定氮法观察到主要现象是在加热和蒸馏过程中，含有氮的样品中的氨被挥发出来，然后被收集并与酸性溶液反应生成铵盐。然后，铵盐通过加碱反应转化为氨气，再进行蒸馏和收集。通过测定收集到的氨的量，可以计算出样品中氮的含量。

根据凯氏定氮原理测定需要三个步骤，即消化、蒸馏、滴定。


消化：将含氮的有机化合物（蛋白质）与浓硫酸和催化剂（硫酸铜或凯氏消化片）一同加热，使蛋白质分解，其中碳和氢被氧化成二氧化碳和水逸出，而样品中的有机氮转化为氨（NH3)并与硫酸结合形成硫酸铵。(铵 NH4+）


消化过程：微火加热煮沸，烧瓶内物质炭化变黑，产生大量泡沫，泡沫消失后加大火力保持微沸状态，至液体成蓝绿色澄清状态后继续加热 05-1h，结束后冷却。（可使用自动消解仪完成前处理工作）


蒸馏：得到的溶液经稀释定容后加入NaOH，蒸馏释放出NH3，冷凝之后收集于硼酸溶液中。


蒸馏过程：先将消化好的样品进行稀释，加入NaOH，经过加热后产生的氨气进入冷凝管，经过冷凝之后流入装有硼酸溶液的接收瓶中。形成硼酸铵。（硼酸溶液中加有混合指示剂，形成硼酸铵之后吸收液由酸性变为碱性，颜色由紫红转变为蓝绿色。）


对有机物进行硝化测氮，液体(沸石)先炭化，温度升高浓硫酸冒白烟，继续硝化溶液颜色变浅漫漫转化为绿色。

蒸馏瓶中过量的氢氧化钠使铜离子转化为褐色的沉淀，硼酸吸收液由红色变为蓝绿色。